溃疡性结肠炎（UC）是一种以结肠黏膜溃疡和慢性炎症为特征的疾病。结肠黏膜屏障由紧密排列的上皮细胞构成，是抵御肠道有害物质的最后一道防线。一旦黏膜受损，肠道抗原便会穿透黏膜下层，激活免疫细胞，从而引发肠道炎症。

尽管免疫抑制和抗炎治疗一直是UC治疗的基石，但这些方法在部分患者中效果不佳，可能是因为它们未能直接促进黏膜愈合。

而黏膜愈合不仅是UC治疗的最终目标，还能显著降低并发症风险，改善患者的生活质量。

近两年研究显示，UC的发病率在男性中明显高于女性，这种性别差异可能与雌激素的保护作用有关。雌激素通过与雌激素受体（ER）结合来发挥其生物学效应，而在结肠组织中，雌激素受体β（ERβ）是主要的亚型。

近日，发表于Acta Pharmaceutica Sinica B的研究文章，首次揭示了ERβ激活与UC患者黏膜愈合之间的正相关性，并证实ERβ通过抑制支链氨基酸运输、激活自噬及促进黏着斑激酶（FAK）的激活，可以加速结肠上皮细胞的迁移和黏膜愈合。

研究者通过免疫荧光染色分析UC患者和健康对照组的结肠组织样本，发现UC患者结肠上皮细胞中ERβ的表达显著降低，尤其在病变区域（图1A-C）。

进一步分析表明，ERβ激活程度与黏膜愈合相关因子（如TFF3、EGF和occludin）的表达呈正相关（图1D-G）。

在DSS诱导的结肠炎小鼠模型中，Esr2（编码ERβ的基因）和其靶基因Cav1的表达在病变区域显著下调（图1H-K），且与黏膜愈合指标（如FITC-葡聚糖渗透性、溃疡评分和内镜下愈合百分比）呈正相关（图1L-N）。

注：（A-C）健康对照组和UC患者结肠组织切片中ERβ和上皮细胞标志物Ep-CAM的表达水平（n=6；与健康对照组相比，P＜0.01）；（D-G）分析健康对照组和UC患者结肠活检组织中黏膜愈合相关因子水平与ESR2表达的相关性；（H-J）正常小鼠和DSS诱导的结肠炎小鼠结肠组织切片中ERβ和上皮细胞标志物Ep-CAM的表达水平（n=12；与正常小鼠相比，P＜0.01；图像比例尺：100 μm）；（K）正常小鼠和DSS诱导的结肠炎小鼠原代结肠上皮细胞中Esr2的表达水平（n=12；与正常小鼠相比，P＜0.01）；（L-N）结肠炎小鼠和正常小鼠中FITC-葡聚糖血清水平、溃疡评分、内镜下伤口愈合百分比与Esr2表达的相关性；（O-Q）结肠炎小鼠和正常小鼠中黏膜愈合相关因子水平与Esr2表达的相关性。

图1 ERβ在结肠上皮细胞中的表达与UC患者及结肠炎小鼠黏膜愈合的相关性

为了验证ERβ激活对黏膜愈合的促进作用，研究者在DSS诱导的结肠炎小鼠模型中，于损伤修复阶段给予ERβ激动剂DPN（1、2.5、5 mg/kg）和LIQ（10、20、40 mg/kg）。

结果显示，DPN和LIQ显著降低了结肠缩短、DAI评分和病理评分（图2A-E），减少了黏膜损伤指标（如溃疡评分和FITC-葡聚糖肠道通透性，图2F-G），并加速了溃疡伤口的愈合（图2H）。组织学分析表明，DPN和LIQ不仅促进了上皮细胞的修复，还增强了腺体再生。

注：（A）小鼠首先饮用含有3.5% DSS的水5天，随后饮用正常水5天。从第6天至第10天，分别给予小鼠ERβ激动剂DPN（1、2.5、5 mg/kg，腹腔注射）和LIQ（10、20、40 mg/kg，口服灌胃），并评估疾病活动指数（DAI）评分；（B, C）结肠长度；（D-F）代表性苏木精-伊红（H&E）染色的结肠切片图像，以及病理评分和溃疡评分；（G）结肠黏膜屏障的通透性；（H）代表性结肠镜图像显示溃疡区域，并定量分析伤口愈合百分比；（I）结肠组织中髓过氧化物酶（MPO）的活性；（J）结肠组织中黏膜愈合相关因子和促炎因子的表达水平。

图2 ERβ激活促进DSS诱导的结肠炎小鼠的结肠黏膜愈合

研究者进一步探讨了ERβ激活对结肠上皮细胞迁移和伤口愈合的影响。体外实验显示，DPN和LIQ显著促进了NCM460和HT-29细胞的伤口愈合，但对细胞增殖无显著影响（图3C-D）。

细胞迁移的关键步骤包括伪足延伸、黏着斑组装、细胞收缩和黏着斑解聚。通过共转染paxillin-mCherry质粒并进行时间序列成像，研究者发现DPN显著缩短了黏着斑的组装和解聚时间，并激活了黏着斑激酶FAK。此外，使用FAK特异性抑制剂PF-573228或siFAK可削弱DPN对黏着斑周转、细胞迁移和伤口愈合的促进作用。

图3 ERβ激活通过加速黏着斑周转促进结肠上皮细胞迁移和伤口愈合

为揭示ERβ激活促进黏着斑周转的机制，研究者进行了转录组学分析，发现DPN处理的细胞中自噬相关基因显著上调，且自噬信号通路富集最为显著。Western blot分析显示，DPN处理增加了自噬相关蛋白Beclin1、ATG5和LC3的表达，并增加了自噬体和自噬溶酶体的数量。

自噬抑制剂3-MA可抑制DPN对FAK激活的促进作用，而自噬溶酶体抑制剂CQ无显著影响，表明ERβ激活主要通过自噬体形成激活FAK。共免疫沉淀实验显示，DPN处理抑制了FAK与自噬相关蛋白FIP200的结合，从而激活FAK并促进黏着斑周转。

进一步代谢组学分析显示，DPN处理的细胞中支链氨基酸（亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸）的运输显著减少，且抑制了支链氨基酸转运蛋白LAT1的表达。通过Cut & Tag实验，研究者发现ERβ激活后可结合到LAT1基因的沉默子区域（silencer2），从而抑制LAT1的表达。支链氨基酸运输的减少抑制了mTOR信号通路，进而激活自噬。

共转染LAT1质粒可逆转DPN对支链氨基酸运输的抑制作用，并抑制自噬激活，同时恢复FAK与FIP200的结合，抑制FAK激活及其下游的黏着斑周转和细胞迁移。

研究者还探讨了ERβ激动剂DPN与常用抗炎药物5-ASA联合使用对结肠炎的治疗效果。结果显示，联合治疗显著降低了DAI评分、结肠缩短和病理评分，并显著促进了黏膜愈合。DPN单独使用可上调黏膜愈合相关因子的表达，而5-ASA单独使用可下调促炎细胞因子的表达。联合使用时，两者协同作用，显著上调黏膜愈合相关因子并下调促炎细胞因子的表达（图4）。

注：小鼠首先饮用含有3.5% DSS的水5天，随后饮用正常水5天。从第6天至第10天，分别给予小鼠ERβ激动剂DPN（2.5 mg/kg，腹腔注射）和5-ASA（100 mg/kg，口服灌胃）。（A） 疾病活动指数（DAI）评分；（B, C） 结肠长度；（D-F） 代表性苏木精-伊红（H&E）染色的结肠“瑞士卷”切片图像，以及病理评分和溃疡评分；（H, I） 代表性结肠镜图像显示溃疡区域，并定量分析伤口愈合百分比；（J, K） 使用RT-qPCR检测结肠组织中黏膜愈合相关因子和促炎因子的表达水平。

图4 ERβ激动剂增强了5-ASA对小鼠结肠炎的改善作用

这项研究首次揭示了ERβ激活与UC黏膜愈合之间的直接联系，并详细阐述了其潜在机制。不仅为UC的治疗提供了新的靶点，还为开发联合治疗策略提供了理论依据。此外，研究中的体内外实验验证了ERβ激动剂与5-ASA的协同作用，为临床治疗提供了一种潜在治疗方案。

参考文献

GUO Y, ZHU Y, ZHANG J, et al. Facilitation of mucosal healing by estrogen receptor β in ulcerative colitis through suppression of branched-chain amino acid transport and subsequent triggering of autophagy in colonic epithelial cells[J]. Acta Pharm Sin B, 2025, 15(1):168-187. DOI: 10.1016/j.apsb.2024.11.014.

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编辑：耳东

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